目的：初步探讨复发性口腔溃疡(recurren t oral ulcer, ROU)患者的发病与其口腔中的幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)之间 的关系。方法：通过聚合酶链反应(polymer ase chain reaction, PCR)，对每位ROU患者口腔中6个不同牙位龈上、龈下共12份菌斑进行 检测，同时设立健康对照组，比较两组检测结果。结果：共检测ROU 患者72例，对照组94例；Hp阳性率分别为56.94%和28.72%，差异非常显著(P<0.01) ；且轻 型ROU患者Hp阳性率明显低于重型ROU患者(P<0.05)。结论：ROU 的发病与口腔中Hp感染可能有关，其致病机理尚待进一步研究。复发性口腔溃疡(recurrent oral ulcer, ROU)又名复发性阿弗他口炎(rec urre
nt aphthou s stomatitis, RAS)、复发性口疮(recurrent phthae)，是口腔粘膜病中最常见的一种。病 因目前尚不十分清楚，国内外学者虽然作了大量研究，提供了许多与该病有关的因素，但均 未得到充分的证实。本文通过对72例ROU患者口腔中不同牙位龈上、龈下菌斑进行Hp-PCR检 测，发现ROU的发病可能与Hp相关。
1 材料和方法
1.1 检测对象
分为ROU组和对照组。ROU组均按全国统编教材《口腔内科学》第三版标准进行诊断，共72例 ，男42例，女30例，年龄9～47岁。对照组为自愿受检者(非ROU患者)，共 94例，男55例，女39例，年龄10～52岁。条件控制：①所有受检者取样 前1周内未服用任何抗生素、铋剂、抗酸剂及H2受体拮抗剂，1月内未服用类固醇类药物 或非类固醇类抗炎药，如阿司匹林等；②所有受检者均不考虑是否为胃炎、胃溃疡等与Hp感 染有关的上消化道疾病患者，但须无严重全身性系统疾病，非Ⅱ度或Ⅱ度以上牙周炎患者； ③两组间年龄、性别、取样牙位和方法、患者牙周条件等可控制因素通过均衡检验，证实无 差异，具有可比性；④ROU患者按轻型ROU、重型ROU和疱疹样ROU分类，然后分别观察其Hp 阳性率检测结果的差别。
1.2 实验方法
所有受检者检测早晨均按指导刷牙，取样前用无菌生理盐水轻轻将口腔漱干净，然后刮取每 位受检者前牙、前磨牙、磨牙上、下颌各1个牙位，尽量取牙周情况较好的牙齿的龈上、龈 下共12份菌斑，置于无菌生理盐水的尖嘴离心管，-40℃保存备检。
将备检菌斑放入400μl无菌生理盐水溶液中离心12 000r/min×5min，弃上 清 ，加DNA裂解液50μl，蛋白酶K 2μl， 55℃孵育1h，100℃水浴10min，同时设置阳性模板 和阴性对照(Pacific Econ-Tech Co. USA PCR试剂盒)；15 000r/min×5min离心后，取5μ l进行PCR检测。取PCR扩增产物15μl，用15g/L琼脂糖凝胶 (含0.5g/L溴化乙锭)经TAE电泳缓冲液，电泳30min(电压5v/cm)后在紫外透射反射仪300nm下 观察结果，如果在200bp处出现橙黄色条带，则诊断为Hp阳性(+)；每一位受检者12份牙菌斑 中只要有1份Hp阳性，则该受检者口腔Hp检测结果统计为阳性。 |
